掃描電子顯微鏡生物樣品制備
日期:2023-04-24
掃描電子顯微鏡(SEM)在生物學中被廣泛應用于生物材料的形態學和超微結構的研究。下面是一般的生物樣品制備步驟:
1.固定樣品:選擇適當的固定劑對生物樣品進行固定,以保持其形態和超微結構的穩定。 常用的固定劑有戊二醛、縮聚磷酸、冷凍、脫水等。
2.取樣:將固定后的樣品用刀片切成適當大小的薄片,以便放入掃描電子顯微鏡觀察。在取樣的過程中需要避免樣品的過度壓縮、撕裂等影響樣品結構的損傷。
3.冷凍破裂:這是一種常見的生物樣品制備方法,特別適用于觀察細胞內部結構。樣品在液氮中快速冷凍,然后在真空中破裂,從而得到內部的超微結構。這種方法可以很好地保持生物樣品的原始狀態,是研究生物超微結構的重要手段之一。
4.真空干燥:將樣品放入真空干燥器中,用低溫下的真空吸收水分,然后用金屬蒸發器蒸發金屬鍍膜,以使樣品表面導電。在干燥的過程中需要避免樣品結構的變形和損傷。
5.金屬鍍膜:由于掃描電子顯微鏡的探針需要樣品表面導電才能得到清晰的圖像,因此需要對樣品進行金屬鍍膜。常用的金屬有金、銀、銅、鉑、鎢等。鍍膜厚度一般在20~30nm之間。
需要注意的是,生物樣品制備過程中需要避免過度處理、過度曝光等,以免影響樣品的超微結構。此外,樣品的制備方法也需要根據不同的研究目的進行優化,以獲得更好的研究效果。
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作者:澤攸科技
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